Cas9(CRISPR)作为目前最常使用的基因编辑系统,Cas9 mRNA 可在细胞内瞬时表达 Cas9 蛋白,在 crRNA 和 tracrRNA 复合物指导下对目的 DNA 序列进行剪切。相比质粒或病毒体系,其可有效降低 CRISPR 基因编辑的脱靶效应,具有高效的基因组剪切效率,适用于哺乳动物细胞基因编辑。
本产品采用 5’Cap 1 结构加帽(加帽率≥95%),3’端设计有长度约 100nt 的 poly (A) 尾巴。同时:
• Cas9 mRNA 编码带有 N 和 C 末端核定位信号(NLS)的 Cas9 蛋白,双 NLS 可提升其向细胞核的递送效率,增强 DNA 切割能力;
• 为便于观察表达,Cas9 的 C 端通过 P2A linker 串联 eGFP 蛋白,转染后可直接观察绿色荧光。
属性 | 参数 |
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产品浓度 | 1mg/mL |
储存溶液 | 1 mM 柠檬酸钠,pH6.5 |
mRNA 序列全长 | 5317nt |
完整性 | ≥ 90% |
产品纯度 | mRNA 电泳条带单一 |
转染效率 | 293T 细胞转染 |
Cas9-eGFP mRNA 在基因编辑及相关研究中应用广泛:
• 基因编辑:实现基因敲除、基因插入、多基因编辑;
• 基因表达调控:通过将 Cas9 与转录激活 / 抑制结构域 融合,精准调控特定基因表达;
• 活体成像:利用荧光标记的 dCas9,追踪重复 DNA 元件、蛋白质编码基因在细胞周期中的动态变化;
• 基因疗法:临床前研究中,探索基于 Cas9 mRNA 的体内基因编辑策略,纠正致病突变。
• 运输:随干冰运输;
• 储存:-15℃~-25℃ 保存,有效期两年。
• 溶解:室温溶解后,需存放于冰盒 / 冰浴,操作中严防 RNase 污染(佩戴手套、使用无酶耗材);使用后立即回存 -20℃。
• 用途:仅限科学研究,禁止用于临床诊断、治疗或食品 / 药品开发。
• 防护:操作时需穿实验服、戴一次性手套,避免直接接触。