基于多肽的核酸递送是一种最新的递送技术，能够显著提升各类细胞，包括原代细胞、难转细胞系的核酸转染。GentleFectTM技术基于高通量多肽筛选平台，精准识别具有相分离潜力的内源多肽序列，开发了针对难转细胞系的Gentle A30全能难转细胞核酸转染试剂。多肽通过液-液相分离自组装形成纳米级微滴，借助细胞膜胞饮作用实现高效内化，在维持细胞活性前提下显著提升各类物种难转细胞的核酸递送效率，尤其是提高大片段基因的递送效率。
• 同时适用于各类核酸分子转染，包括DNA, mRNA, siRNA, circRNA, Crispr等；
• 预混合转染液和转染缓冲液，仅需往试剂中加入核酸，即可完成转染配置。
短期4℃保存，长期-20℃保存。
• Gentle A30 全能难转细胞核酸转染试剂：试剂A，试剂B
悬浮细胞为悬浮培养，故相对于贴壁细胞每孔可以培养更多的细胞，可以根据细胞情况进行调整。此外，这两类细胞都可在细胞传代时进行转染操作，贴壁细胞无需提前铺板，大大简化实验步骤；经大量实验发现，制备的细胞悬液在EP管中与转染混合液孵育可使转染效率最大化。
建议按照说明书推荐的转染试剂用量进行转染或根据细胞量来等比增加/减少转染试剂的用量，其中悬浮细胞可以根据客户细胞培养时的常用密度进行转染
建议还是使用Opti-MEM，虽然有些培养基称为无血清培养基，但某些无血清培养基可能仍含有特定的蛋白质或蛋白质组分，以满足细胞生长的需求，因此此类无血清培养基，在转染时还是使用Opti-MEM进行转染。
① 转染前应确保细胞处于良好的生长状态，建议细胞活率大于90%;
② 适当增加转染试剂和核酸的用量。
③ 适当延长转染时间，孵育时间长短影响阳性率和细胞活率，根据细胞特性可尝试更短或更长孵育时间。一般建议在1小时到2小时之间。
① 细胞转染孵育时请勿使用含FBS的培养基，FBS会严重影响细胞转染效果；
② Gentle A30转染试剂不建议剧烈涡旋，推荐使用移液器温和反复吹打混匀。
① 本文中出现的离心程序设置均为室温，300g，5分钟；
② 在转染结束后，可加入1 mL完全培养基轻吹混匀，终止转染的同时可去除转染试剂对细胞离心的影响（转染试剂轻微粘稠是属于正常现象）；
③ 在转染结束时，EP管离心后没有看到细胞沉淀是正常现象，这是细胞量较少导致的，可在吸取上清液时留20-50 μL液体，防止吸取到细胞
Gentle A30 全能难转细胞核酸转染试剂产品说明书 v1.3
